常用荧光光源介绍
2019-12-24 12:17:56
荧光光源主要应用在荧光显微镜中，是细胞生物学的基本工具，它是由光源、滤光片、透镜等光学系统等主要部件组成，是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大观察标本的荧光图像而实现对荧光样品的定性定量研究。
激发、滤光、成像、淬灭。荧光实验的调整本质上就是协调好以上四个因素得到最好的效果，一个常被忽视的方面是光源的使用，荧光显微镜的常用光源主要有白光光源、高压汞灯、氙灯、金属卤素灯、LED，以及最新的二极管激光光源。
1、汞灯
超高压汞灯(50≤200 W)由石英玻璃制成，中间呈球形，并含有一定量的汞，它在两个电极之间排出，导致汞蒸发，球体内的压力迅速增加，当汞完全蒸发时，可达到50×70标准大气压。这一过程一般需要5分钟左右，超高压汞灯的发光是电极间放电引起汞分子解离和还原过程中光子发射的结果，它散发出强烈的紫外线和蓝紫光，足以刺激各种荧光物质，因此在荧光显微镜中得到了广泛的应用。
2、氙灯
氙灯和汞灯作为白光光源，可以提供从紫外到近红外的一系列波长，但它们有不同的激发光谱，水银灯聚焦于近紫外、蓝光和绿光，能产生高激发能峰值的明亮荧光信号，但具有较强的光毒性，因此，高压氧用于固定样品或弱荧光成像，相比之下，氙光源的激发相对平缓，可以用来比较不同波长之间的强度，比如测量钙离子浓度。氙灯的强激发为800~1000 nm近红外。
XBO较HBO的特点：
1）光谱强度更均匀
2）在红外及中红外仍有较强光谱强度
3）能量较强更易到达物镜后孔径
推荐产品：xbo75w，100W氙气灯，一般使用寿命：400H，1200h。
3、金属卤素灯
这是近年来出现的一种光源。它与汞灯的激发光谱非常相似，但通过光纤连接到显微镜上，可以散热，寿命更长，将光纤从光源连接到显微镜可以大大减少光产生的热量，用于活细胞成像的金属卤化物灯的另一个优点是内置的强度设计装置，它可以很容易地调节受激光。
推荐产品：XPO金属卤素灯光源，功率在120W左右，适用于各大厂家的高端荧光显微镜，使用寿命2500小时以上。
4、LED。光源开关以毫秒为单位，缩短了样品在光下的曝光时间，延长了寿命。此外，LED光的衰减是快速和准确的，这可以大大降低光毒性在长期活细胞测试，与白光相比，LED只能在较窄的光谱范围内激发，多个LED波段使LED光源能够提供多色荧光的应用。
推荐产品：蔡司科利布里，使用寿命几千小时。
5、激光光源。它是一种利用二极管发射单波长激光的光源，该光源的好处是激发光波长超窄，成像不容易产生噪点，局限就是各染料厂家提供的荧光染料的激发波长会有差异，如果用单波长的激光激发，有时候会导致激发能量不足的情况。
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